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2024-3-14

一、精選內毒素更低批次細胞對內毒素非常敏感，過高的內毒素可誘導細胞釋放炎癥因子、引導細胞衰老或凋亡。不僅如此，胎牛血清會經常或長時間作用于細胞，一旦內毒素含量過高，細胞相當于長期在“有在毒培養基”中生長，被內毒素影響，細胞將處于“亞健康狀態”，進而影響實驗結果的穩定與準確性。因此，為保證細胞的健康，在培養細胞時，應該選用內毒素含量盡可能低的血清，以保障實驗的順利進行。Ausbian®進口特級胎牛血清，選擇內毒素含量≤3EU/ml，澳洲進口血源，曾經是細胞典藏等重大項目...

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細胞培養中的污染監控與檢測——真菌上一篇文章中，我們說到如果在養細胞的過程中，如何判斷細胞是否被細菌感染以及如何祛除細菌污染。還沒看的戳戳下面的鏈接直達細胞培養中的污染監控與檢測——細菌今天我們來討論一下，細胞培養過程中的真菌感染。二、真菌污染真菌概述真菌是一類具真核和細胞壁的異養生物。真菌可以通過孢子延續種群，典型的營養體為絲狀分支結構。可污染細胞培養基的真菌種類繁多，最常見的有曲霉菌，白色念珠菌，酵母菌，黑霉菌，孢子菌等。真菌污染癥狀與其他污染相比，真菌污染更容易被觀察到。具體表現為：在培養基中會形成淡黃... 查看詳情 2022-03-04
細胞培養注意事項~血清血清1、血清分為：a)新生牛血清（新生的小牛5天內取血）；b)小牛血清（16周內的小牛取血）；c)胎牛血清（剖腹取出胎兒制成的）。2、我們買來的血清多處于冰凍狀態，滅活前放到4度冰箱，使其緩慢溶化。56度水浴45分鐘滅活，滅活后冷卻至室溫再放回冰箱冷凍層中。滅活是滅活補體系統中具有蛋白酶活性的成分，對于一些難養的細胞，滅活補體是很重要的。但是滅活的溫度也可能會破壞血清中的生長因子，所以到底該不該滅活血清，還沒有一個很明確的標準，可能還是要視情況而定吧。3、血清在溶化過程中，纖... 查看詳情 2022-03-04
細胞培養中的污染監控與檢測——細菌細胞培養是生物醫學研究的常見操作，其中避免細菌污染是重要一環。細胞是否干凈，直接關系到實驗結果穩定性的好壞。一般情況下細胞實驗過程中出現的常見污染主要有：細菌污染、真菌污染和支原體污染。每種情況又分別有不同的癥狀和解決方法。我們將分三篇文章，簡要概述三種不同污染的癥狀及處理方法。一、細菌污染細菌概述細菌是一種原核細胞微生物，一般為微米級別。細胞培養過程中常見的污染菌為大腸桿菌、葡萄球菌、假單胞菌等。細菌污染癥狀與其他污染相比，細菌污染在細胞培養過程中“發病”更為迅速，較容易被... 查看詳情 2022-03-03
支原體污染的細胞都會出現哪些表現？細胞培養被支原體污染是個世界性問題，在細胞培養中支原體感染發生率達到63%。支原體是一類無細胞壁，形態呈高度多形性，為圓形、絲狀或梨形，其直徑僅有0.13～0.18μm，變形能力大，故能通過濾菌器，突出的結構特征是沒有細胞壁，對作用于細胞壁生物合成的抗生素不敏感。研究表明，支原體能耗盡營養物，促進代謝積累，導致pH改變，對細胞造成多種影響，包括生長狀況、生化特性、代謝、免疫、以及細胞存活等多方面的改變，繼而干擾實驗結果，或造成無法解釋的差異。更加不幸的是拯救被感染的細胞幾乎是... 查看詳情 2022-03-03
細胞培養注意事項~培養基培養基1、培養基的選擇依細胞種類而定。如果是從別的實驗室借來的細胞，最初階段一定要保持細胞原有的培養條件；特殊種類的細胞，比如內皮細胞，可以借鑒網上培養成功的條件，添加一些特定成分。2、液體培養基的保存條件應是冰箱4度冷藏。小六兒見過有的大實驗室細胞量多，一次性購買的培養基瓶數也多，有些人可能覺得-20冰箱保存時間會更久一些。但是經過冷凍后的培養基再溶化時，你會發現培養基的顏色發生變化，顏色變深，這就是培養基的PH值升高了。3、培養基中都含有大量的谷氨酰胺，用來合成細胞生長所... 查看詳情 2022-03-01
細胞培養注意事項~無菌操作無菌操作細胞培養最看重的就是無菌操作，無菌操作是細胞培養是否成功的關鍵點。1、使用前用75%的乙醇擦拭細胞間的桌面、超凈臺、孵箱和離心機等；紫外照射細胞間和超凈臺30分鐘以上才可以進入使用。2、進入細胞間必須穿上隔離服或者細胞間專用的白大衣，戴上手套和口罩，換上拖鞋，嚴格意義上來說，帽子也是要帶的。除了隔離服，其他穿著物品最好一次性使用。3、凡是放入超凈臺中的不是一次性使用的物品事先都需要經過高壓滅菌；不能進行高壓處理的物品也需要經過75%的乙醇消毒。包括酒精燈、吸管、移液器... 查看詳情 2022-03-01

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