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2024-3-14

一、精選內毒素更低批次細胞對內毒素非常敏感，過高的內毒素可誘導細胞釋放炎癥因子、引導細胞衰老或凋亡。不僅如此，胎牛血清會經常或長時間作用于細胞，一旦內毒素含量過高，細胞相當于長期在“有在毒培養基”中生長，被內毒素影響，細胞將處于“亞健康狀態”，進而影響實驗結果的穩定與準確性。因此，為保證細胞的健康，在培養細胞時，應該選用內毒素含量盡可能低的血清，以保障實驗的順利進行。Ausbian®進口特級胎牛血清，選擇內毒素含量≤3EU/ml，澳洲進口血源，曾經是細胞典藏等重大項目...

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細胞培養的基本知識——細胞培養的無菌環境細胞培養是一種無菌技術，要求工作環境和條件必須保證無微生物和不受其他有害因素的影響。為防止微生物污染和有害因素的影響，細胞培養室要求環境清潔，空氣清新、干燥、無塵。細胞培養實驗室由無菌操作區、孵育區、制備區、儲藏區、清洗和消毒滅菌區6部分組成，這些區域的共同特點是房間要寬敞、明亮，地面要便于清潔、防滑，墻壁的質地光滑堅硬，儀器設備布局合理，方便操作，避免交叉干擾，陳設簡潔，便于清掃。一、無菌室無菌室的結構：一般由更衣間、緩沖間、操作間三部分組成。無菌室的消毒和防污染：為保持無... 查看詳情 2021-11-25
支原體常規檢測方法匯總（三）細胞培養過程中支原體檢測方法如約而至第三期來啦！還沒有看前兩期內容的小伙伴可以看我之前發的：支原體常規檢測方法匯總（一）、支原體常規檢測方法匯總（二）上回書和上上回書說道qPCR檢測法是一種目前比較常用效果也比較可靠的方法那除了qPCR還有沒有其他方法可以檢測呢？所以今天就來講講分離培養法和DNA染色法有請兩位主角閃亮登場01、分離培養法簡單來說，這種方法的基本原理就是：分離，然后培養聽君一席話如聽一席話，展開來講，就是從可疑的細胞培養體系中取樣，接種到適宜支原體生長的瓊脂平... 查看詳情 2021-11-25
支原體常規檢測方法匯總~之二上周我們一起討論了基于Venor®GemqEP試劑盒的支原體qPCR經典檢測法，也是目前使用比較廣泛的方法之一。當然啦，關于支原體的檢測，方法眾多。今天我們就來了解一下，操作相對更簡單的“一步法”。該方法會用到MinervaBiolabs公司的另一種試劑盒——VenorGeM®OneStep，它與上周介紹的經典法試劑盒類似，都是利用了熒光定量PCR的基本原理。（前情提要在這里，戳戳下方圖片傳送到經典法支原體檢測試劑盒詳解）不同的是，“一步法”試劑盒中，直接將內... 查看詳情 2021-11-24
細胞培養的小常識——體內、外細胞的差異和分化現代生物技術一般認為包括基因工程技術、細胞工程技術、酶工程技術和發酵工程技術，而這些技術的發展幾乎都與細胞培養有密切關系，特別是在醫藥領域的發展，細胞培養更具有特殊的作用和價值。比如基因工程藥物或疫苗在研究生產過程中很多是通過細胞培養來實現的。基因工程乙肝疫苗很多是以CHO細胞作為載體；細胞工程中更是離不細胞培養，雜交瘤單克隆抗體，*是通過細胞培養來實現的，既使是現在飛速發展的基因工程抗體也離不開細胞培養。正在倍受重視的基因治療、體細胞治療也要經過細胞培養過程才能實現，發酵工... 查看詳情 2021-11-24
血清的使用與儲存：正確的使用及保存血清，使血清發揮應有的作用使用前處理：大部分血清在使用前必須滅活處理，即56℃30分鐘。滅活的目的是去除血清中的補體成分，避免補體對細胞產生毒性作用。血清經過滅活也會損失一些對細胞有利的成分，如生長因子，因此也有人提出血清不經滅活直接用于培養，這樣做的前提是確認血清中不含補體成分。對于一些品質高的胎牛血清和新牛血清可以考慮不經滅活直接用于細胞培養。儲存條件：血清一般儲存于－20℃，同時應避免反復凍融。購買大包裝的血清后，首先要滅活處理，然后分裝成小包裝，儲存于－20℃，使用前融化。融化時最好現置于4℃... 查看詳情 2021-11-23
血清質量的鑒定一般包括哪幾個方面理化性質：如滲透壓、pH值、蛋白電泳圖譜、蛋白含量、激素水平、內毒素等。蛋白含量包括血清總蛋白含量（不低于35-45g/L）、球蛋白含量（應小于20g/L)、血紅蛋白含量等。其中球蛋白含量是一項非常重要的指標，血清中球蛋白主要是抗體，球蛋白含量越低血清質量越高。血紅蛋白也是越低越好。微生物檢測：包括細菌、真菌、支原體、病毒等。特別是對支原體、病毒的檢測，支原體是一種很小的微生物，可通過孔徑22u的濾膜。支原體、病毒污染在光學顯微鏡下難于察覺，細胞也能生長繁殖，但會影響實驗結果... 查看詳情 2021-11-23

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