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2024-3-14

一、精選內毒素更低批次細胞對內毒素非常敏感，過高的內毒素可誘導細胞釋放炎癥因子、引導細胞衰老或凋亡。不僅如此，胎牛血清會經?；蜷L時間作用于細胞，一旦內毒素含量過高，細胞相當于長期在“有在毒培養基”中生長，被內毒素影響，細胞將處于“亞健康狀態”，進而影響實驗結果的穩定與準確性。因此，為保證細胞的健康，在培養細胞時，應該選用內毒素含量盡可能低的血清，以保障實驗的順利進行。Ausbian®進口特級胎牛血清，選擇內毒素含量≤3EU/ml，澳洲進口血源，曾經是細胞典藏等重大項目...

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支原體 DNA染色法及其優缺點支原體有多種檢查方法，其中熒光法檢測支原體DNA是藥典記載的方法，又被稱為DNA染色法或指示細胞培養法。它的原理和操作大致如下：將供試品接種于指示細胞（無污染的Vero細胞或經國家藥品檢定機構認可的其他細胞，供試品應對該細胞生長無影響。下面以Vero細胞為例）中培養后，用特異熒光染料（如Hoechst33258）染色。Vero細胞經消化后，需制成每1ml含10的5次方的細胞懸液，以每孔0.5ml接種到6孔細胞培養板。每孔再加無抗生素DMEM培養基3ml，在細胞孵箱培養過夜，備... 查看詳情 2020-11-16
論適血清的篩選牛血清是重要的細胞培養添加成分，但目前牛血清的類型有胎牛血清、新生牛血清、補鐵新生牛血清等，其性能和價格均不相同。胎牛血清培養效果通常來說是jia。而補鐵新生牛血清對于一些細胞類型，其效果可等價于胎牛血清，或優于常規新生牛血清。三種血清價格也各不相同。適血清的選擇，與各實驗室、生產企業的條件和需求有關，與所培養細胞類型有關。除了以往根據經驗和文獻報道，必要時也可進行針對特定細胞的血清篩選試驗，以篩選出jia血清。2020年8月《生物學雜志》第4期刊登了一篇《不同類型牛血清對M... 查看詳情 2020-11-16
PCR檢查支原體是對藥典方法的重要補充支原體是導致體外細胞污染的重要污染源。用于生物制品生產的細胞基質或治療性細胞。產品被支原體污染后，支原體或支原體代謝產物可進入人體，并對人體產生嚴重危害。因此，對支原體污染的有效檢測是確保細胞基質及治療性細胞產品質量的前提。支原體傳統檢測方法為培養法和指示細胞染色法，這兩種均是“藥典方法”。但缺點是耗時長，靈敏度低。此外，這兩種方法均無法明確所感染支原體的類型。因此，采用PCR或qPCR檢測支原體的高度保守序列，用于制藥工業的放行檢測，逐漸成為一種趨勢。當然，核酸擴增法也存在... 查看詳情 2020-11-13
DNA污染監測的一種方法對于高靈敏的PCR技術來說，少量的DNA污染就可導致PCR假像或假陽性。污染的DNA來自于氣溶膠中DNA的片段。這些氣溶膠中的DNA可源自離心機、移液器和其它實驗室設備，或從PCR反應管中飛濺出來。它們很難去除，并可能導致樣品之間的交叉污染。在擴增過程中檢測到的單個外源DNA分子，就可給整個實驗過程和結果詮釋帶來很多問題。不幸的是，即使是經驗豐富的實驗室，DNA污染也會偶爾發生，并且只有當PCR檢測到時，才會引起注意。值得指出的是，桌面和實驗室工作區，以及分子生物學實驗室中的... 查看詳情 2020-11-13
哪些細胞培養時，對內毒素水平格外敏感胎牛血清主要的作用就是提供基本的營養物質以及提供接觸和伸展因子，它是采自5-8個月胎齡牛胚胎中的胎血。此時胎牛各臟器正處生長分化階段，血中含有豐富的生長發育因子，非常適合各種細胞的培養，一旦胚胎發育*這些因子自動消失。因此8個月胎齡以上的牛胚胎，已接近足月，不能作為胎牛血清的原料來使用。有下列情況者，對血清內毒素應格外留意篩選：1.養干細胞時，干細胞對內毒素非常敏感，如果血清中內毒素≥3EU/ml時，干細胞很容易死亡。很多使用者，在血清在試用前，就通過提早審核該批次《檢測報告... 查看詳情 2020-11-13
細胞培養時，鏡下有小黑點，怎么解決？有些實驗人員報告，細胞培養時在鏡下發現有小黑點。這是有污染嗎?應如何處理?一旦您在細胞培養的過程中發現有黑點生成，可采取下列步驟：首先，要肉眼觀察培養基是否混濁，然后，在鏡下觀察培養細胞生長的狀態，黑點是否游動。如果細胞被污染，微生物則會大量繁殖，培養基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀察細胞，生長狀態良好，與黑點出現前相比，沒有任何變化，那么，黑點的出現可能與以下幾種情況有關：(1)細胞生長過老，破碎的細胞殘骸;(2)血清質量不好，反復凍融的... 查看詳情 2020-11-12

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